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飼料中的氨基酸檢測方法

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飼料中的氨基酸檢測方法

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儀器及試劑

儀 器

1). 天平一臺(精度0.1mg);

2). 恒溫水浴鍋一臺;

3). 容量瓶;

4). 試管(1.5×15cm或1.5×10cm);

5). 微量進樣器(5ul或10μl)一支;

6). 微量可調移液槍(1000ul)一支、吸頭多個;

7). 旋渦混勻器一臺;

8). HPLC系統及氨基酸分析專用柱(4.6×250mm);

試劑

1). 超純水(≥18MΩ?cm);

2). 乙腈(HPLC級);

3). 三水合醋酸鈉(分析純);

4). 冰醋酸(分析純);

5). 衍生試劑A和衍生試劑B溶液,至于冰箱保存(衍生試劑包對身體有害,用時請做好防護措施);

6). 正己烷(HPLC級)。

二、樣品制備

準確稱取飼料10-50 mg,置于25 ml塞比色管中,加1.0 mol/L鹽酸10 ml攪拌提取15 min,靜置10分鐘,將上清液過濾到100 ml量瓶中,殘渣加1.0 mol/L鹽酸10 ml攪拌3 min,重復提取兩次,合并上清液,收集濾液并加1.0 mol/L鹽酸定容至刻度,搖勻。

三、流動相的配制

流動相A: 0.1mol/L醋酸鈉溶液(pH 6.5):乙睛=93:7

配制方法:準確稱取三水合醋酸鈉13.6g于1000ml水中,攪拌均勻,使之溶解,用冰醋酸或氫氧化鈉溶液調pH值至6.5;準確量取配制好的三水合醋酸鈉溶液465ml和乙腈35ml,混合均勻,抽濾過0.45μm濾膜;  

流動相B:水:乙腈=20:80

配制方法:準確量取水100ml和乙腈400ml,混合均勻,抽濾過0.45μm濾膜;

飼料中氨基酸測定.jpg

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